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固相萃取—定量濃縮在蔬菜水果農藥殘留檢測中的應用
農業生產者為獲得更多的產品，加大了各種農藥的使用量，促使農藥殘留問題日趨嚴峻，因此，農產品質量安全的監管和檢測工作顯得尤為重要。為促進農產品質量安全的檢驗檢測工作，我國相繼推出了一系列國家標準和行業標準分析方法，使蔬菜水果多殘留農藥檢測技術得到了快速推廣。由于蔬菜水果樣品基質復雜，含有的色素等干擾物質，嚴重干擾了提取液中農藥殘留的檢測，因而農藥殘留的前處理技術尤為重要，但是目前蔬菜水果中多殘留農藥分析的前處理存在操作繁瑣、自動化程度低、提取凈化效率低、溶劑使用量大、溶劑揮發物毒害檢測人員等缺點。為此，本研究根據相關國家標準和行業標準分析方法，采用全自動固相萃取-定量濃縮儀，用乙腈+甲苯提取，石墨碳黑/氨基（GCB/NH2）固相萃取柱富集凈化，建立了全自動固相萃取-濃縮-定容蔬菜水果多殘留農藥檢測前處理方法。
1 實驗部分
1.1 儀器與設備 LabTech PrepElite-SV全自動固相萃取-定量濃縮前處理平臺（美國萊伯泰科有限公司），GC2010-PLUS氣相色譜儀（日本島津公司），配備FPD檢測器，色譜柱：Rtx-1701（30m×0.25mm×0.25μm毛細柱），高速離心機HC-3018（安徽中科中佳科學儀器有限公司）。
1.2 試劑與材料 丙酮、乙腈和甲苯均為色譜純，無水硫酸鈉為分析純650℃灼燒4h，氯化鈉為優級純140℃烘烤4h，水為去離子水。提取溶劑為乙腈+甲苯（3+1）。CNWBOND GCB/NH2石墨化炭黑/氨基復合SPE柱（500mg/500mg/6mL）。13種農藥標準品：敵敵畏（Dichlorvos）、甲胺磷（Methamidophos）、乙酰甲胺磷（Acephate）、甲拌磷（Phorate）、氧樂果（Omethoate）、久效磷（Monocrotophos）、磷銨（Phoshamidon）、對硫磷（Parathion）、毒死蜱（Chlorpyrifos）、殺螟硫磷（Fenitrothion）、甲基對硫磷（Parathion-methyl）、水胺硫磷（Isocarbophos）、三唑磷（Triazophos），購于上海農藥研究所有限公司，濃度均為100μg/mL。
1.3 工作液的配制 標準工作溶液的配制：各取0.200mL上述農藥標準液于10mL容量瓶中，用丙酮稀釋定容，配制成各農藥組分質量濃度均為2μg/mL的混合工作液。由此工作液通過稀釋得到0.05、0.10、0.20、0.40、0.80μg/mL共5個濃度的混合標準工作液，貯存在4℃冰箱中備用。
1.4 樣品前處理
1.4.1 樣品的提取 稱取10g（至0.01g）均勻試樣，置于50mL離心管中，加入20mL提取溶劑乙腈+甲苯（3+1），用均質器在15 000r/min勻漿提取1min，加入3g氯化鈉，在勻漿提取1min，將離心管放入離心機，在3 000r/min離心5min，取上清液10mL裝入LabTech PrepElite-SV全自動固相萃取—定量濃縮前處理平臺的進樣瓶中待凈化。
1.4.2 樣品的凈化和定容 首先向CNWBOND GCB/NH2石墨化炭黑/氨基復合SPE柱（500mg/500mg/6mL）中填充高約2cm的無水硫酸鈉，放入LabTech PrepElite-SV全自動固相萃取-定量濃縮前處理平臺的萃取柱架中。設置固相萃取-定容濃縮方法如下：氮氣壓力調至0.05MP，真空泵真空度為-0.03MP。SPE固相萃取設置內容：方法類型為保留目標物；潤洗設為收集次數為0次、溶劑類型為乙腈+甲苯（3+1）、體積為7.0mL、流速為1.0mL/min、干燥時間為0s；上樣設為收集次數為1次、溶劑類型為待凈化樣品、體積為4.0mL、流速為1.5mL/min、干燥時間為0s；洗脫設為收集次數為1次、溶劑類型為乙腈+甲苯（3+1）、體積為24.0mL、流速為1.5mL/min、干燥時間為30s。Concentration濃縮定量設置內容：濃縮方式為定量濃縮、定容體積為2.0mL、加熱溫度為50℃；清洗溶劑（指實驗結束清洗濃縮杯）為溶劑1（丙酮）、清洗次數為2次，體積為5mL、清洗時間為15s，吹干為1min。編輯批處理表或單針運行，填入相應參數（定容用S1丙酮），樣品經上述步驟凈化濃縮定容后，終收集到用丙酮定容為2.0mL的待測樣品。
1.5 色譜條件 色譜柱：Rtx-1701（30m×0.25mm×0.25um毛細柱）載氣：高純氮氣（99.999%），載氣流量：1.01mL/min，氫氣62.5mL/min，空氣90mL/min，吹掃3.0mL/min，FPD檢測器，檢測器溫度280℃，進樣口溫度250℃，進樣方式：不分流自動進樣，控制模式：線速度28cm/s，升溫程序：90℃保持1.0min、以18℃/min升到200℃保持0.0min、以1℃/min升到212℃保持0.0min、以15℃/min升到220℃保持2.0min、以30℃/min升到270℃保持5.0min，進樣量1.0μL，定量方法：峰面積外標法定量。
2 結果與分析
2.1 目標物質的分離效果 取0.2μg/mL標準溶液，按照上述色譜條件測定，13種有機磷農藥可得到良好的分離效果，出峰順序依次為：敵敵畏（6.613min）、甲胺磷（7.364min）、乙酰甲胺磷（9.642min）、甲拌磷（10834min）、氧樂果（12.013min）、久效磷（14.156min）、磷銨1（14.815min）、毒死蜱（16.770min）、甲基對硫磷（17.219min）、磷銨2（17.367min）、殺螟硫磷（18.497min）、對硫磷（19.675min）、水胺硫磷（20.718min）、三唑磷（25.881min），得到色譜圖1。
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圖1 0.2μg/mL13種標準物質色譜
注：1敵敵畏（6.613min），2甲胺磷（7.364min），3乙酰甲胺磷（9.642min），4甲拌磷（10834min），5氧樂果（12.013min），6久效磷（14.156min），7磷銨1（14.815min），8毒死蜱（16.770min），9甲基對硫磷（17.219min），10磷銨2（17.367min），11殺螟硫磷（18.497min），12對硫磷（19.675min），13水胺硫磷（20.718min），14三唑磷（25.881min）。
2.2 線性范圍及相關系數 線性范圍為：0.05～0.80μg/mL，各濃度分別為：0.05、0.10、0.20、0.40、0.80μg/mL，按上述色譜條件進樣分析，通過計算得到相關系數、線性方程、檢出限，見表1。
2.3 方法的回收率與精密度 在已知不含農藥殘留的西葫蘆樣品中，添加13種有機磷農藥，計算得到各農藥含量為0.3mg/kg3個重復樣品，使用上述“1.4樣品前處理”方法進行樣品提取后分析，3個添加相同濃度的樣品回收率和精密度見表2。由表2可知，13種有機磷農藥的平均回收率在76.72%～100.93%，相對標準偏差RSD在1.41%～7.22%，檢測中未出現色譜峰干擾情況，回收率高，重復性良好。
3 結論
本文研究并建立一種全自動固相萃取-濃縮-定容蔬菜水果多殘留農藥檢測前處理方法，方法符合農藥殘留的檢測要求，實現了前處理過程自動化。該方法實用性強、自動化程度高、凈化效果好、干擾少、重現性好、回收率高，可以有效保護檢驗員免受有有機溶劑毒害，能夠滿足蔬菜水果中多殘留農藥的檢測需求。
